麦冬有效成分对NADPH氧化酶活性的抑制作用文献综述

麦冬有效成分对NADPH氧化酶活性的抑制作用

麦冬为常用中药材，为百合科植物麦冬(Ophiopogonjaponicus (Thunb) Ker-Gawl)的干燥块根，气微香，味甘、味苦。具有养阴生津，润肺清心等功效。研究表明，麦冬中主要含有甾体皂苷、黄酮、多糖、氨基酸等成分。近年关于麦冬药理作用的研究表明，麦冬具有强心、利尿、抗菌等药理作用，此外，在治疗心律失常、糖尿病等疾病，增强免疫作用等方面，具有明显的疗效。

麦冬中的有效成分包括甾体类：麦门冬皂苷(Ophiopogonin) A, B, B＇, C, C＇, D, D＇, 其中A, B, C, D的皂苷元为鲁斯可皂苷元(Ruscogenin )，B＇, C＇, D＇的苷元为薯蓣皂苷元(diosgenin )；黄酮类：目前从麦冬及其变种中分得的19个黄酮类化合物均为高异黄酮类(homoisoflavonoids )，麦冬变种中分离出9个高异黄酮，即甲基麦冬二氢黄酮A、甲基麦冬二氢黄酮B、甲基麦冬黄酮A、甲基麦冬黄酮B、麦冬黄酮A、麦冬黄酮B、异麦冬黄酮A、去甲基异麦冬黄酮B、麦冬二氢黄酮A；其他成分：麦冬中含0.086%的挥发油，还含有beta;-谷甾醇(beta;-Sitosterol)，豆甾醇(beta;-Stigmasterol)，beta;-谷甾醇-3-O-beta;-D葡萄糖苷和龙脑苷。

作为存在于麦冬中的主要有效成分，薯蓣皂苷元，是产生甾体激素类药物的主要原料，具有抗肿瘤、抗炎、心血管保护等药理活性；高异黄酮类也具有抗炎、抗肿瘤、磷酸化抑制作用和血管保护作用，并日益引起国内外学者的关注。

中性粒细胞(PMN)作为宿主防御外来病原体入侵的第一道防线，其激活后主要通过呼吸爆发(释放氧自由基) 和脱颗粒(释放多种蛋白水解酶) 而发挥杀菌功能。但PMN 是一把双刃剑，正常时能消灭外源性病原体、清除坏死组织、促进伤口愈合，是机体的保护者。但在某些病理条件下(如严重创伤、烧伤、休克) ，PMN 过度激活却可阻塞微循环、损伤血管内皮细胞和血管外组织细胞、释放和促进释放炎症介质，成为破坏者，是导致系统性炎症反应综合征(SIRS)，多器官功能不全综合征(MODS) 的重要原因^[1]。

活性氧簇(reactive oxygen species，ROS)是一类氧衍生的分子，包括超氧化物(superoxide，O₂^-)、过氧化物(hydrogen peroxide，H₂O₂)、羟自由基(hydroxyl radical)及各种脂质过氧化反应的产物，线粒体偶联的酶，细胞色素P450-氧化物酶(CYP 2E1)、NOX、黄嘌呤氧化物(xanthine oxidase)及参与花生四烯酸代谢的酶都能产生ROS^[2]。由于ROS能与大多数细胞大分子发生反应，使酶失活，引起DNA损伤，修饰翻译后的蛋白及脂质过氧化反应损伤细胞膜，长期将视为对细胞有害的分子^[3-4]。然而最近的研究发现，NOX/Duox家族产生的ROS参与介导细胞内许多信息通路，参与调控细胞的生长、细胞分裂、分化、迁移、凋亡及衰老等许多生理活动，也与疾病的发生密切相关^[5-6]。 现在认为，NADPH氧化酶(NADPH oxidase, NOX)/Dual氧化酶(Duox)家族是以精确调节的方式ROS，能作为第二信使影响各种细胞的信号转导。所以，抑制NADPH氧化酶的活性，具有很大的生理学意义。

NOX是由6个亚基构成的多蛋白复合体。吞噬细胞型NOX的结构为：催化亚基gp91^Phox（又称为NOX2）和调节p22^Phox在细胞膜上形成异二聚体（又称为黄素细胞色素b558），其他亚基通常位于细胞质中，包括p47^Phox, p40^Phox, p67^Phox和小G蛋白Rac(small GTPase Rac)。其激活的经典机制是各种刺激诱导p47^Phox, p67^Phox, p40^Phox和Rac激活，然后这4种细胞质内的蛋白向细胞膜异位，与其他两个亚基p22^Phox和NOX2相互作用，结果将NADPH的两个电子连续传递给氧分子而产生超氧化合物O₂^{- [7-8]}。非吞噬细胞型NOX在结构与功能上都与吞噬细胞型NOX相似，只是不同类型的细胞NOX的亚基构成不同。目前发现了6种gp91^Phox(NOX2)的同源蛋白(NOX1, NOX3, NOX4, NOX5, DUOX1和DUOX2)，p47^Phox和p67^Phox也发现了它们的同系物，分别是NOXO1(NOX organizer 1)和NOXA1(NOX activated 1)^[9-10]。Rac蛋白的亚基有Rac1, Rac1b, Rac2和Rac3。Rac2只参与吞噬细胞型NOX的激活，Rac1则参与所有非吞噬细胞型NOX的激活^[11]。

受体酪氨酸激酶(Receptor tyrosine kinase, RTK)包括胞外段、跨膜区段和胞内段三部分，其胞内段具有蛋白酪氨酸激酶(Protein tyrosine kinase, PTK)活性。胞外刺激信号一般通过PTK上特定的氨基酸序列同包浆蛋白结合，再经过MAPK、磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase, PI3-K)、JAK/STAT和70kD S₆激酶四条途径向下传导，本课题着重研究MAPK和PI3-K通路，试着从这两条通路来研究麦冬有效成分对NADPH氧化酶活性的抑制机理。

据文献记载，PTK参与了PMN呼吸爆发和脱颗粒的信号转导过程。用fMLP刺激PMN后，PTK活性增强，O₂^-产生增加，PTK抑制剂可阻断这种反应。通过增加质膜上磷酸酪氨酸磷酸酶活性使PTK的失活增加，也能抑制O₂^-的产生^[12]。