还原敏感型siRNA/纳米粒复合物体内药效学研究文献综述

课题解决的问题以聚乙烯亚胺（PEI）为代表的阳离子聚合物因其转染效率高而作为基因载体已得到广泛研究。

但是随之带来的细胞毒性大，安全性低亦限制了其在抗肿瘤治疗方面的应用。

本项目预构建双载药的纳米粒非病毒载体，该载体作为小分子抗癌药物与基因的共传递体不仅可发挥基因从根本上调控癌细胞凋亡的作用，同时可大大降低小分子抗癌药物的给药剂量，降低毒副作用，实现高效能抗肿瘤疗效；重要的是该载体中LMHA可对分布在多种肿瘤细胞上的CD44受体进行特异性结合，从而具有肿瘤靶向性。

　　本项目已用乳化-溶剂挥发法成功制备了以聚丙交酯乙交酯共聚物（Polylactide glycolide copolymer，PLGA）为内核，聚乙烯亚胺（Polyethyleneimine，PEI）嵌合并作为外壳的胶束样纳米粒。

将该二元结构作为主体，表面包被低分子量透明质酸（Hyaluronic acid，LMHA）并通过静电结合力结合COX-2特异性siRNA，通过PLGA疏水作用力包载以多西他赛（Docetaxel，DTX）为小分子模型药物的疏水性小分子抗癌药物，构建了小分子抗癌药物与基因药物共传递系统。

同时已从不同方面对该递送系统进行了多项体内外评价：凝胶电泳法评价基因与载体结合效果、阴离子环境稳定性及酶环境稳定性；透析法考察多西他赛体外释放行为；采用MTT法对空白载体进行了毒性评价；以SGC-7901胃癌细胞为模型，对细胞转染效率及胞内抑制率进行了考察。

　　现阶段，为了考察纳米载体上的siRNA在体外细胞内的药效作用，设计采用RT-PCR技术和Western Blot技术进行评价；为了考察其在体内的靶向性，采用活体成像技术进行评价。

二、研究方法和技术路线　　细胞药效学评价技术：　　1、RT-PCR技术　　评估siRNA对相关mPNA的转录的抑制作用　　Western Blot 技术评估肿瘤细胞表达的相关蛋白的情况　　体内靶向性评价技术：　　活体成像技术　　实验方法：　　将双载药纳米制剂中添加特定荧光染料，对荷瘤小鼠进行尾静脉注射，观测在不同时间点时在不同部位的荧光强度，以表现制剂靶向性。

　　三、论文课题研究进度安排　　　2013年3月04日----3月12日 确定选题，查阅文献。

　　　2013年3月12日----3月22日 撰写开题报告。