五酯片对Nrf2-Nqo1通路的影响
1、研究背景:
五酯片是中药南五味子的醇浸膏,可改善肝细胞代谢,临床常用于慢性、迁延性肝炎患者的护肝治疗,能降低血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平。已有研究表明,五味子醇提取物可明显提高肝脏抗氧化系统的防御能力。而Nrf2是细胞防御氧化应激的重要转录因子,生理状态下,Nrf2与胞浆蛋白伴侣分子Keap1偶联,锚合于胞质,处于活性相对抑制状态。在细胞处于氧化应激状态或有其他亲核剂信号刺激时,Nrf2可与Keap1发生解偶联,从而被激活转入细胞核内,与抗氧化反应元件(antioxdantresponseelement,ARE)结合,调节下游抗氧化酶基因Nqo1的表达,从而增强细胞对氧化应激的耐受性。我们设想五酯片的护肝作用是否是由于五酯片能够使Nrf2/Nqo1通路的基因表达上调来引发挥的,因此本实验旨在研究五酯片对Nrf2-NQO1通路的作用和影响。
2、研究目的:
探讨五酯片对肝脏Nrf2-NQO1的mRNA和蛋白表达水平的作用和影响。
3、研究内容及方法:
1.动物实验:通过动物实验来评价五酯片的护肝作用。
1.1实验动物分组与给药:将小鼠随机平均分成两组,空白对照组给予生理盐水;给药组给予五酯片,12小时一次,一天两次,于第四天给药(即第7次给药)6小时后摘眼球处死,取得血液及肝脏。
1.3ALT,AST检测:取得的血清按试剂盒说明书,赖氏法比色测定。
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